收藏浅部真菌及皮肤癣的鉴定上

黎明导读

在中国90%以上的真菌病属浅部真菌病,真菌只侵犯表、角质层、毛发和甲板。侵犯皮下组织和内脏的称深部真菌病。

头癣

主要致病菌:紫色毛癣菌、断发毛癣菌、犬小孢子菌。其他菌:许兰毛癣菌、铁锈色小孢子菌

体股癣

红色毛癣菌、须癣毛癣菌、犬小孢子菌、紫色毛癣菌

手足癣

红色毛癣菌、絮状表皮癣菌、须癣毛癣菌

甲真菌病

酵母菌(念珠菌)、红色毛癣菌、须癣毛癣菌、絮状表皮癣菌

浅部真菌病是由寄生于角蛋白组织的致病真菌所引起的皮肤病,其病原菌可分为:角层癣菌、皮肤癣菌

角层癣菌

角层癣菌:寄生于皮肤角层或毛干表面而不破坏毛发结构的致病真菌可谓之角层癣菌。此类癣菌又分两型,即角层型和毛发型。

角层型有:花斑癣菌、红癣(纤细棒状杆菌),掌黑癣菌(曼逊枝孢霉菌)及威尼克外瓶霉菌;

毛发型有:腋毛癣菌(微小棒状杆菌)、毛结节菌病(黑色毛结节菌和白色毛结节菌)。

由于角层癣菌是寄生于人体组织的表面,故一般不引起组织的炎症反应,即使有也极轻微。

角层癣菌主要病原菌:马拉色菌属(Malassezia)、亚洲型毛结节菌(何德毛结节菌)、欧洲型毛结节菌(白吉利毛孢子菌(Trichosporonbeigelii)

花斑糠疹

旧称花斑癣,俗称汗斑,是由马拉色菌(又称糠秕马拉色菌/糠秕孢子菌)感染表皮角质层引起的一种浅表真菌病。本病呈慢性,有轻度的炎症,通常无自觉症状。损害特征为散在或融合的色素减退或色素沉着斑,上有糠秕状的脱屑,好发于胸部,背部,上臂,腋下,有时也波及面部。

马拉色菌

马拉色菌属目前分为17个种。常引起马拉色菌毛囊炎(Malasseziafolliculitis)曾称糠秕孢子菌毛囊炎。本病男性多于女性,16-40岁好发。临床表现皮损为毛囊性半球状红色丘疹,直径2-4mm,有光泽,周围可有红晕,好发于胸背、颈、肩、上臂、腰腹部,散在对称分布,数十至数百个,较密集但不融合,可间杂有小脓疱或黑头粉刺。本病病源为马拉色菌,马拉色菌为一种条件致病性真菌,绝大数人皮肤存在这种真菌,但只在一定条件下发病。发病原因马拉色菌是一种嗜脂性真菌,在皮肤皮脂腺分泌旺盛的情况下,该真菌依赖皮肤分泌的油脂生存和大量繁殖,以导致马拉色菌毛囊炎感染。常在使用大剂量广谱抗生素或糖皮质激素基础上发病或加重,皮肤免疫功能低下也是一个原因。自觉瘙痒,可见抓痕血痂。部分患者有风团、片状红斑或皮肤划痕症阳性。皮肤较油腻。可伴有面部痤疮、花斑癣、多汗、表皮囊肿等,有瘢痕素质者在此毛囊炎基础上可发生瘢良疙瘩。

检验方法,在表面皮屑直接采用透明胶带在患处粘取标本经真菌荧光染色处理,在荧光显微镜下可观察到成簇、壁厚的圆形孢子和香蕉形或’S‘形短菌丝。孢子呈卵形、圆形或球形,形似“手雷”,有时可长出菌丝。

图马拉色菌x形态特征香蕉型或S型的菌丝荧光染色

常见的马拉色菌种有:糠秕马拉色菌、厚皮马拉色菌、球形马拉色菌、合轴马拉色菌、钝形马拉色菌等。那它们在显微镜镜下是怎么样的形态呢?

各位请往下看:

图糠秕马拉色菌x

图球形马拉色菌x

图合轴马拉色菌x

图钝形马拉色菌x

你也许有疑惑了,为什么自己平时用KOH处理看到临床标本不是这样,而且有时候临床症状很明显是马拉色菌引起的,但显微镜直接镜检结果却没看到孢子或菌丝呢?这个时候就需要借助真菌检验神器了——真菌荧光染色(配合紫外光的荧光显微镜)

请往继续往下看:

脚癣皮肤标本

头癣,头发标本

标本用KOH处理后,在普通显微镜镜下,并不能清晰的发现真菌菌丝和孢子,大大受约检验人员的经验。而标本荧光染色后,在荧光背景下真菌菌丝、孢子清晰可见,检测灵敏度大幅提高。

在KOH湿片法中,孢子与脂肪滴有时很难鉴别,而荧光染色法对脂肪滴不产生标记,易于鉴别,且特异性高,其能使少量真菌着染,弥补了传统的KOH湿片法在真菌数量少时检出率不高的不足,并且染色时间短,只需1min,结果直观。

与传统真菌镜检与真菌荧光染色对比表一种快速检测真菌的试剂,检测范围广,阳性率高,远优于传统湿片法,临床上毛囊炎糠秕孢子,马拉色菌的检测湿片法基本无效,而荧光法可敏感快速的检测出来,医保收费,需使用荧光显微镜。内容传统真菌镜检真菌荧光染色真菌荧光染色的临床优势操作环节取样→滴加一定浓度的KOH溶液→经酒精灯加热固定→光学显微镜观察取样→滴加荧光染色液→加盖盖玻片→荧光显微镜观察操作同样简洁,需要时间短,适用于临床大样本,快速检测。检测结果找到真菌菌丝或者孢子结构,得出结果根据看到荧光标记的真菌菌丝或者孢子结构,得出结果可以明确明辨糠皮孢子感染、马拉色菌感染(检查糠皮孢子的派克墨水法敏感度更高,不用加热环节,有利于临床实际应用。)浮载液10%~20%的KOH或者复方氢氧化钾溶液配方KOH(氢氧化钾)溶解杂质细胞,荧光剂:与真菌细胞壁中成分发生非特异性的结合;1、检测灵明度很高,减少检查结果假阴性的发生,进而降低漏检漏检率,提高了皮屑真菌检测的准确率;2、视野清,反应为荧光反应,因此其结果在显微镜视野中以清晰的荧光表现,更易于观察;3、抗干扰强,检测原理是染色液与真菌细胞壁中几丁质等多糖成分反应,因此可排出检测中的其他干扰。检测器材光学显微镜荧光显微镜,显微成像系统(CCD),电子狗荧光显微镜:产生匹配染色液中荧光染色剂的激发光,我们所需的激发光为紫外光,并在目镜下观察染色剂染色效果的仪器;显微成像系统:可将荧光显微镜目镜视野中的染色结果呈现在电脑屏幕上;有利于对检测结果的再次开发使用,如科研、教学等电子狗:显微镜厂家为方便在特定电脑上使用厂家设计的报告打印系统所提供的一个安全保护措施。辅助材料载玻片,盖玻片,滤纸载玻片,盖玻片,滤纸与传统镜检方式用材一样

与传统方法优劣势对比

真菌荧光染色效果图

图真菌荧光染色:有隔菌丝

图真菌荧光染色:无隔菌丝

图真菌荧光染色:串状的孢子和菌丝

真菌荧光染色已医院开展

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